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人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
樣本收集與前期準備 利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。(一) 臨床樣本的收集A、血液樣本 有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應在標本上注明該因素。1.外周血 一般選取左手無名指內側采血,該部位應無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規檢測(如白細胞計數、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量一致。涉及到體內出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數,出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。2.靜脈血 除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。B、尿液樣本 同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現假陽性和假陰性結果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數即Addis計數(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學物質的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質,選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養,要求無菌,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應足量,最少12 ml,50 ml,定時尿須全部收集,對女性患者應避免陰道分泌物、經血污染尿標本。C、糞便樣本 糞便標本的檢測對判斷消化系統疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數應收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養體應于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內應檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應及時用PBS進行緩沖處理,離心去上清保存。D、腦脊液樣本 腦脊液標本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結果:如細胞變性,破壞,導致計數和分類不準;有些化學物質如葡萄糖等將分解含量減少;細菌發生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,管作細菌培養,第二管作化學分析和免疫學檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應注意安全。E、胸腹水樣本 與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,及時送檢。一般也分裝三管,一管作常規細胞學檢查,一管生化檢查,一管細菌培養,順序以與腦脊液相同為宜。F、前列腺液樣本 前列腺液標本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。G、精液樣本 精液標本采集前應禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,一般應檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。H、陰道分泌物樣本 陰道標本采集前24小時應禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,經期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。
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標本要求:1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性。
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英文名稱:Human anti-typhus antibody ELISA Kit
ELISA試劑盒規格:48T/96T
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Elisa試劑盒:96T/48T
Elisa試劑盒保存期限為6個月
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Elisa試劑盒性能1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%
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CAS:85386-98-7,1-(3-碘-2-吡啶基)哌嗪,規格:1gCAS:86873-60-1價格,5-氯吡啶-2-羧酸價格,1gCAS:7758-87-4,磷酸三鈣/β-三磷酸鈣/磷酸鈣/三堿式磷酸鈣/原磷酸鈣/脫磷酸鈣/Calcigenol simple,LR,250克,RT環十五(碳)烯氧化物價格,5gCAS:119692-4價格,2-Methoxy-6-(trifluoromethyl)benzoic acid價格,CAS:220405-40-3,2,2-二氟-1,3-二甲基-咪唑烷,英文名稱:2,2-Difluoro-1,3-dimethylimidazolidine編號:bs-2417R,細胞毒性受體NK-p46抗體,Anti-CD335/NKp46/NCR1,規格:0.1ml/0.2ml,編號:bs-1162R,生長調節致癌基因β/黑素瘤生激因子抗體,Anti-GROβ(growth regulatedoncogeneβ),規格:0.1ml/0.2ml,[1,1'-Bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium(II價格,氘代重水10*1ml,99.9%,CAS:14109-72-9價格,1-甲基硫代-2-價格,5gEPA505有機農藥-Mix1,標準品,EPA505Mix1,CAS:352525-98-5,6-乙氧基-2-萘硼酸,英文名稱:6-Ethoxy-2-naphthaleneboronicacid3-Chloro-5-fluoro-4-methoxyphenylacetic acid價格,2CAS:7439-92-1價格,鉛價格,15x15cm甲肝抗體(IgG)*,方法:CB(進口原料),標準范圍:,標準范圍:定性,反應溫度及時間:45℃2小時 ,加樣量:10μl,RTh聚乙烯亞胺價格,10mlCAS:1641-61-8,環己基磷酸二甲酯,規格:10gCAS:79950-65-5,N-Boc-N'-芐氧甲基-L-組氨酸,英文名稱:N-Boc-N'-benzyloxymethyl-L-histidineCAS:350988-62-4價格,3-鄰-基-1H-吡唑-4-甲醛價格,1gCAS:6362-63-6,3-氰基-3-苯基酸乙酯,純度:97%,規格:5g2357-52-0|4-溴-2-氟苯甲醚,產品名稱:4-溴-2-氟苯甲醚CasNo:2357-52-0分子式:C7H6BrFO分子量:20503含量:98%CAS:138-52-3,D(-)-水楊苷,英文名稱:D(-)-SalicinCAS:685-83-6,雙(二乙基氨基)氯膦,純度:94%,規格:5g槐角苷CAS:152-95-4,Sophoricoside,升血糖作用;槐角浸羔注射于家兔,能使血糖一時性增高。據南京藥物研究所報道,從槐角中提出的染料木素和山柰酚,具有干擾孕卵運輸、終止孕卵著床和抗早期 兔白介素17說明書(IL-17)Elisa檢測試劑盒價格CAS:1413038價格,1,4-雙(1-羥基環己基)-1,3-丁二炔價格,5gCAS:1302-93-8,硅酸鋁,英文名稱:Aluminumsilicate兔子S100B蛋白 S-100B價格Elisa試劑盒現貨,rabbit Soluble protein-100B,S-100B ELISA試劑盒,96T/48T88-60-8|6-叔丁基間甲酚,產品名稱:6-叔丁基間甲酚 Cas No.:88-60-8 分子式:C11H16O 分子量:164.25 含量:98%CAS:112022-83-0價格,(R)-2-甲基-CBS-氧雜硼啶單水合物價格,250mgCAS:141-90-2,2-硫脲嘧啶,英文名稱:2-ThiouracilCAS:121-89-1,間硝基苯乙酮,英文名稱:3′-NitroacetophenoneCAS:89466-08-0,2-羥基苯硼酸,97%價格|現貨,Hydroxyphenylboronic Aci,0.9796T/48T,人(TGFβ2),轉化生長因子β2Elisa試劑盒,Human transforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA試劑盒 CAS:110-03-2,2,5-二甲基-2,5-己二醇,純度:99%,規格:5g編號:bs-0585R,Smad4抗體,Anti-Smad4(Mothersagainstdecapentaplegichomolog4),Anti-Smad4(Mothersagainstdecapentaplegichomolog4)CAS:48234-64-6,(三苯甲基)三苯基氯化磷,純度:98%,規格:10g苯甲醚,規格及包裝:AR,500ml硝酸鈰,規格及包裝:AR,25gCAS:6315-90-8價格,4,5-亞甲基-2-硝基肉桂酸價格,5gCAS:106950-18-9,4-Phenyl-2-(4-pyridyl)thiazole,純度:97%,規格:1g
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1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。
5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請最后乘以稀釋倍數。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T 產品保存條件:低溫
產品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血,
骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
提供實驗代測服務
特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
有效期:6個月
預期應用:ELISA法定量測定人血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正,F象,不會對實驗結果造成任何影響。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。需要而未提供的試劑和器材
1. 標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當的稀釋倍數。只有稀釋至標準曲線的范圍內,檢測的結果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。最后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。
如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
生物素標記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
操作步驟
實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。
注:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。
洗板方法手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
計算
以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。 更多產品信息,請點擊進入公司網址:www.shxysw.net
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北京綠源博德 是一家集研發、生產和銷售于一體的高科技生物技術公司。
經國家相關部門批準注冊和和技術服務于一體的高科技企業,目前已與國內各大科研單位、高校、醫院以及化工食品等領域實驗室建立了長期良好的合作關系。致力于向國內外生命科學研究人員提供一流的產品和服務。
公司業務主要涵蓋以下幾個方面:
▲試劑盒:ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、細胞凋亡試劑盒。
▲細 胞:原裝進口原代細胞、細胞系、細胞株、專業培養基、常用傳統培養基。
▲生化試劑:原裝進口生化試劑、進口分裝生化試劑、國產生化試劑以及分子生物學試劑。
▲抗 體:進口原裝抗體、進口分裝抗體、一抗、二抗。
▲耗 材:細胞培養耗材、普通實驗耗材。
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