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酶聯(lián)免疫試劑盒,人B因子ELISA試劑盒現(xiàn)貨

      工作原理一.人B因子(BF)elisa試劑盒實驗原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。
二.試劑盒性能
1. 靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
三.人B因子(BF)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存
1).細胞培養(yǎng)上清:
適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:
用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:
在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:
包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:
切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作流程四.人B因子(BF)ELISA試劑盒操作步驟
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
3)標準品的稀釋:準備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設(shè)置復(fù)孔。
4)加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加生物素標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
7)加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙徹底拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘,加入50ul終止液。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應(yīng)后的30分鐘內(nèi),以免影響準確性。
五.?dāng)?shù)據(jù)計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實際濃度。
注意事項六.注意事項
1)實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2)加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免第一孔與最后一孔間的時間間隔過大,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復(fù)性。
3)孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
4)建議實驗前預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
5)建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系,如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
七.保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個月
訂購流程八.人B因子(BF)ELISA試劑盒訂貨說明
1)賣方確保所訂產(chǎn)品與目錄技術(shù)指標保持一致;
2)為了確保買方產(chǎn)品在運輸中的質(zhì)量,對有特殊要求的低溫產(chǎn)品予以濕冰運輸。
3)收到貨物后如出現(xiàn)質(zhì)量問題,買方需在收到貨物一個月內(nèi)向賣方提出書面異議。買方逾期不提出異議,視為貨物符合其要求,賣方不付任何責(zé)任。
4)出現(xiàn)質(zhì)量以外的問題,如破損等,買方應(yīng)在收貨后一個周內(nèi)提出。買方未按時提出異議,視為該產(chǎn)品合格。
本公司對所有售出的產(chǎn)品保證質(zhì)量,并提供良好的售后服務(wù),有關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量的投訴,請在收到貨物的32天內(nèi)以書面形式提出,并向我公司技術(shù)人員提供相應(yīng)的材料,我們會及時派人解決。所有形式的賠償或退換僅限于產(chǎn)品本身,不涉及其他間接內(nèi)容。凡購買本公司任意款elisa試劑盒,均可享受免費代測服務(wù),并提供技術(shù)指導(dǎo)。
該公司產(chǎn)品分類: 維生素C代謝系列 谷胱甘肽系列 輔酶Ⅱ系列 輔酶Ⅰ系列 生化試劑盒 分子學(xué)類 生化學(xué)類 酶聯(lián)免疫學(xué)類 代理品牌 兔酶聯(lián)免疫試劑盒 牛酶聯(lián)免疫試劑盒 豬酶聯(lián)免疫試劑盒 原裝酶聯(lián)免疫試劑盒 小鼠酶聯(lián)免疫試劑盒 大鼠酶聯(lián)免疫試劑盒 人酶聯(lián)免疫試劑盒 酶聯(lián)免疫試劑盒 多克隆抗體 單克隆抗體 ABCAM抗體

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規(guī)格:96T/48T

性狀:盒裝液體

保存: 2

利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

人ELISA試劑盒,人B因子ELISA試劑盒本試劑僅供研究使用

1、準備試劑,樣品和標準品2、加入準備好的樣品和標準品,37度反應(yīng)30分鐘3、洗板5次,加入酶標試劑,37度反應(yīng)30分鐘4、洗板5次,加入顯色液AB37度顯色10分鐘5、加入終止液615分鐘內(nèi)讀OD7、計算。

人ELISA試劑盒,人B因子ELISA試劑盒 實驗規(guī)則:

1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但最好有專業(yè)人員進行矯正。

2、要配備20ul50ul100ul1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。

4、實驗時,要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。

10、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.40.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。

13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。

14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。

15、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。

16、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

17、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。

18、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。

人ELISA試劑盒,人B因子ELISA試劑盒 產(chǎn)品購買流程:

1、銀行匯款:匯款帳號向和您聯(lián)系的銷售人員索要

溫馨提示:我公司是款到發(fā)貨,所以請客戶配合。如果您不放心我們會先給您簽訂合同,開好發(fā)票寄給您,您再打款。打款中請確認好賬號和用戶名,把你所需要的貨物名稱、數(shù)量。以及匯入銀行錢數(shù)及時通知公司人員,然后把詳細的收貨地址、姓名電話告訴我們,以便我們及時發(fā)貨。

2、發(fā)貨方式:一般默認發(fā)快遞,特殊情況是EMS

3、查貨方法:向銷售人員確定快遞公司,撥打客服電話咨詢或者登陸快遞公司網(wǎng)站查詢貨物發(fā)貨情況。

人ELISA試劑盒,人B因子ELISA試劑盒 產(chǎn)品訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。

2、部分非常用產(chǎn)品,需提前12日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。

3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日最新價格為準。

4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。

5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、短信、電話等形式通知我們。

該公司產(chǎn)品分類: PCR試劑盒 其他方法試劑盒 血清 細胞 抗體 elisa試劑盒 犬elisa試劑盒 貓elisa試劑盒 試劑 標準品 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 溶血性鏈球菌 產(chǎn)氣莢膜梭菌 蠟樣芽孢桿菌 彎曲菌 四環(huán)素檢定 酵母 弧菌檢驗系列 沙門氏菌 金黃色葡萄球菌檢驗系列

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人B因子Elisa試劑盒,BF試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng),款到即可發(fā)貨,快遞時間3天左右。

規(guī)格:96T/48T

保存條件:2-8℃低溫保存

庫存:現(xiàn)貨供應(yīng)

保質(zhì)期:六個月

運輸:快遞運輸(可根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式,無特殊要求我公司一般為中通或韻達)

用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷

本公司的ELISA試劑盒,品質(zhì)高,靈敏度好,曲線漂亮,無效包退包換,還可提供免費代測服務(wù),各種種屬、各種系列ELISA科研實驗檢測試劑盒,詳情可來電咨詢我公司銷售人員或咨詢我公司在線客服QQ。

人B因子Elisa試劑盒,BF試劑盒操作步驟:

1.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

2.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

3.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

4.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

5.溫育:

人B因子Elisa試劑盒,BF試劑盒注意事項:

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

人B因子Elisa試劑盒,BF試劑盒樣本收集與前期準備 

        利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

(一) 臨床樣本的收集

A、血液樣本

    有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無法避免,應(yīng)在標本上注明該因素。

1.外周血

    一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對燒傷病人,可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù)、分類等)受生理因素影響波動過大,比較時宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),出血時間或凝血時間等)的檢測,一定要注意了解患者是否用過抗凝、促凝藥物,以便在減少或避免干擾因素的影響。

2.靜脈血

    除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清。在血清檢測項目中,有些(如血糖,血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,一般以清晨空腹血標本為宜;有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等),0~4℃貯存活性減弱也不一,這些項目的檢測必須及時而快速;有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,尤其涉及血鉀,LDH等的測定。

B、尿液樣本

    同血標本一樣,尿液標本受飲食、運動、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿。晨尿是指清晨起床后的次尿標本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細胞,上皮細胞,管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運動、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時的尿標本可增加試驗敏感性,檢出較輕微的病變。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),因時間較長,細菌易繁殖,須加入防腐劑甲醛。24小時尿(天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量,包括蛋白,糖,尿17-酮、17-羥類固醇,兒茶酚胺,Ca2+等,檢測不同的物質(zhì),選擇不同的防腐劑防腐。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),要求無菌,沖洗外陰后留取標本。所有尿標本的收集都應(yīng)足量,最少12 ml,50 ml,定時尿須全部收集,對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物、經(jīng)血污染尿標本。

C、糞便樣本

    糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液、膿血等異常病變成分的糞便,對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24小時糞便。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查,從有膿血和稀軟處取材,保溫送檢。查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血部分,孵化毛蚴時至少留取30g糞便,且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。隱血試驗(化學(xué)法),試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑,維生素C等。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢,以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,應(yīng)及時用PBS進行緩沖處理,離心去上清保存。

D、腦脊液樣本

    腦脊液標本采集后立即送檢,放置過久將影響檢驗結(jié)果:如細胞變性,破壞,導(dǎo)致計數(shù)和分類不準;有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少;細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管,管作細菌培養(yǎng),第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,第三管作一般性狀及顯微鏡檢查,三管的順序不宜顛倒。因標本采集較難,全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。

E、胸腹水樣本

    與腦脊液標本一樣,采集后的標本注意安全,及時送檢。一般也分裝三管,一管作常規(guī)細胞學(xué)檢查,一管生化檢查,一管細菌培養(yǎng),順序以與腦脊液相同為宜。

F、前列腺液樣本

    前列腺液標本由前列腺按摩后采集,液量少時直接滴在載玻片上及時送檢,須注意防止標本蒸干,量多時收集在潔凈干燥的試管中。若按摩不出前列腺液,可檢查按摩后的尿液沉渣。

G、精液樣本

    精液標本采集前應(yīng)禁欲3~7天,排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中,保溫并及時送檢。由于精子生成日間變動較大,一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。

H、陰道分泌物樣本

    陰道標本采集前24小時應(yīng)禁止房事、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等,取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管口等處取材,制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本。

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